Distribuce Po intravenózní injekci se fluorescein rychle distribuuje a během několika sekund se objeví v retinální tkáni.
50 až 84 % fluoresceinu je vázáno na plasmatické proteiny (zejména na albumin) a 15 až 17 % na erytrocyty.
Biotransformace Po intravenózním podání se fluorescein rychle přemění na fluoresceinglukuronid, který rovněž má fluorescenční vlastnosti.
Plasmatické eliminační poločasy fluoresceinu a fluoresceinglukuronidu jsou 23,5, respektive minut.
Po 4 až 5 hodinách je téměř veškerá plasmatická fluorescence způsobená fluoresceinglukuronidem.
Plasmatická farmakokinetika fluoresceinu je u diabetiků a nediabetiků stejná.
Eliminace Fluorescein a jeho metabolity se eliminují žlučí a močí. 90 % eliminace nastane do 48 hodin. Fluorescein je detekovatelný v moči během 24 až 36 hodin.